十年前，轉(zhuǎn)化醫(yī)學(xué)還是一個方興未艾的全新概念，到今天，隨著技術(shù)的日新月異，它已經(jīng)成為令人矚目的研究焦點，其不斷實現(xiàn)的成果，為臨床領(lǐng)域的實踐提供了有效、便捷、廉價的服務(wù)手段和模式。5月16日，在杭州舉辦的“2014轉(zhuǎn)化醫(yī)學(xué)高峰論壇”上，賽默飛世爾科技公司旗下Life Technologies中國區(qū)儀器平臺消瘦總監(jiān)張焱女士指出，基因組工具的發(fā)展突飛猛進，轉(zhuǎn)化醫(yī)學(xué)正從一個平臺深入到醫(yī)療領(lǐng)域的方方面面，創(chuàng)新技術(shù)和方法令人應(yīng)接不暇，臨床應(yīng)用迎來了前所未有的機遇期。為了能更好地順應(yīng)這一趨勢，無論是儀器設(shè)備的制造商和消瘦商還是研究人員，都需要和終端使用者密切聯(lián)系，共同開發(fā)出適應(yīng)市場需求的產(chǎn)品。

    基因轉(zhuǎn)化醫(yī)療服務(wù)成果顯著

    1992年，美國《科學(xué)》雜志首次提出了基因檢測從實驗室到病床的概念，2003年，美國**衛(wèi)生研究院（NIH）院長Zerhouni在《自然》雜志上為轉(zhuǎn)化醫(yī)學(xué)發(fā)展畫出路線圖，希望填補基礎(chǔ)研究與臨床應(yīng)用之間的鴻溝。其“從實驗臺到病床”的轉(zhuǎn)化醫(yī)學(xué)理念，旨在將實驗室的科研成果轉(zhuǎn)化為有價值的臨床應(yīng)用。

    基因檢測就是典型的轉(zhuǎn)化醫(yī)學(xué)應(yīng)用。本世紀(jì)初，人類基因組草圖繪制的完成標(biāo)志著第一代基因測序技術(shù)的成熟，對一個或幾個基因的測序開始應(yīng)用在臨床上，對基因突變測量的分辨率得以提升，在傳染病的鑒定以及癌癥等致命性疾病的靶向治療中應(yīng)用廣泛。2013年5月，著名女星安吉麗娜·茱莉在《**》上發(fā)表了《我的醫(yī)療選擇》一文，宣布通過基因檢測，發(fā)現(xiàn)自己攜帶了“錯誤的基因”BRCA1，確定她罹患乳腺癌的幾率為87%，她選擇采取預(yù)防性雙側(cè)乳腺切除手術(shù)，希望將這一風(fēng)險降至5%，這一舉動將基因測序轉(zhuǎn)化醫(yī)學(xué)的成果帶入全球公眾的視線，成為“從實驗臺到病床”的一次經(jīng)典嘗試，也為基因檢測技術(shù)市場帶來新的契機。

    通過對基因篩查和檢測，可盡早發(fā)現(xiàn)遺傳病因，進行腫瘤風(fēng)險預(yù)測與個體化治療，依據(jù)藥物基因組學(xué)采用個體化用藥，對傳染病病原微生物和病毒的鑒定等，幫助醫(yī)生診斷疾病的型別，同時指導(dǎo)醫(yī)生對患者個體提出合理的解決方案，使得診療更安全、更快速和更有效。

    一代測序和新一代測序技術(shù)各有千秋

    目前，基因檢測的市場依賴于技術(shù)發(fā)展獲得推廣。一代測序在臨床上經(jīng)過了十多年的發(fā)展，逐漸建立了完整的體系，并不斷地將成本降低，漸漸的成為老百姓討論的話題，也反過來促進了測序市場的發(fā)展。第一代檢測技術(shù)是對一個***基因片段做檢測，1986年發(fā)展至今已27年，技術(shù)上成熟、簡單、可靠；而新一代高通量測序可以對多個基因片斷進行檢測并對單分子基因做大規(guī)模平行測序。

    實踐表明，以前完成一個人類基因組的測序需要3年時間，使用了新一代測序技術(shù)僅僅需要1周，在序列讀長方面比起第一代測序技術(shù)則要短很多。瑞士Viollier AG 實驗室負(fù)責(zé)人Kurth博士舉例說，對非小細(xì)胞肺癌中的ALK（間變性淋巴激酶）基因進行測序，以前用PCR（多重鏈?zhǔn)椒磻?yīng)聚合技術(shù)）抓取，時間大約1—3周，而使用了出自Life Technologies公司的Ion Ampliseq，即基于高通量新一代基因測序設(shè)備，調(diào)動目的基因或靶向基因的方法，使得基因檢測的時間只需1—2小時。

    從應(yīng)用角度上講，一代和新一代測序設(shè)備在功能上是并存關(guān)系，而非完全的替代關(guān)系。

    廣東省人民醫(yī)院廣東省肺癌研究所副所長、中心實驗室主任張緒超研究員認(rèn)為，作為分子檢測金標(biāo)準(zhǔn)，一代測序已經(jīng)成為個性化治療廣闊市場的主角，而新一代測序則是未來基因檢測市場的應(yīng)用方向；其升級版本主要在實驗室和臨床試用階段，還沒有獲得廣泛的臨床應(yīng)用。

    測序技術(shù)與臨床結(jié)合應(yīng)用廣泛

    參加此次杭州轉(zhuǎn)化醫(yī)學(xué)論壇的澳大利亞西澳大學(xué)的Richard Allcock教授一直做致病基因的篩查研究，從事過產(chǎn)前篩查、脊椎病等基因檢測。在對神經(jīng)肌肉疾病的基因測序中，他在Ion Torrent 測序平臺上，從336個相關(guān)基因中找尋69個相關(guān)基因，并從中發(fā)現(xiàn)了一種致病基因。Richard Allcock教授表示，首先，利用新一代技術(shù)要比一代技術(shù)節(jié)省時間，無須單個基因一隔一個比對，其次，疾病基因的找尋和檢驗應(yīng)該與臨床治療全面結(jié)合，一旦找到對應(yīng)致病基因的位點后，研究人員應(yīng)與臨床醫(yī)生相互合作，將臨床治療結(jié)果隨時反饋給研究平臺。由雙方共同提出臨床方案，應(yīng)該是未來基因測序應(yīng)用的一種最佳模式。

    藥明康德公司孫樂***士指出，美國在CLIA（臨床實驗室改進修正案標(biāo)準(zhǔn)）認(rèn)證實驗室中，采用Ion Torrent系列平臺及 AmpliSeq定制Panel進行腫瘤基因檢測服務(wù)，比如波士頓兒童醫(yī)院有產(chǎn)前遺傳病篩查的項目，M.D. Anderson癌癥中心、美國梅奧診所等醫(yī)學(xué)中心開展乳腺癌、直腸癌等癌癥相關(guān)的熱點基因檢測。

    數(shù)字PCR技術(shù)有待推廣

    數(shù)字PCR（Digital PCR-dPCR）技術(shù)是一種新的核酸（DNA/RNA）檢測和定量方法，與傳統(tǒng)定量PCR（qPCR）技術(shù)不同，其采用絕對定量的方式，不依賴于標(biāo)準(zhǔn)曲線和參照樣本，直接檢測目標(biāo)序列的拷貝數(shù)。由于這種檢測方式具有比傳統(tǒng)qPCR更加出色的靈敏度和特異性、精確性，dPCR迅速得到廣泛的應(yīng)用。

    據(jù)介紹，這項技術(shù)在極微量核酸樣本檢測、復(fù)雜背景下稀有突變檢測和表達(dá)量微小差異鑒定方面表現(xiàn)出的優(yōu)勢已被普遍認(rèn)可，而其在基因表達(dá)研究、microRNA研究、基因組拷貝數(shù)鑒定、癌癥標(biāo)志物稀有突變檢測、致病微生物鑒定、轉(zhuǎn)基因成分鑒定、NGS測序文庫精確定量和結(jié)果驗證等諸多方面具有的廣闊應(yīng)用前景受到越來越多的關(guān)注，但是，在應(yīng)用層面還有待推廣。

    “測序技術(shù)不斷推陳出新，我們期待著能在臨床實踐中有更多的應(yīng)用，”張焱說，“研究機構(gòu)和臨床醫(yī)生的合作和信任是轉(zhuǎn)換醫(yī)學(xué)的關(guān)鍵，我們將樂于為此模式而努力。”