【PPT】【專家講座】血液乙肝、丙肝和艾滋病病毒核酸檢測(cè)技術(shù) - 醫(yī)學(xué)資源下載
資源作者：hehelili
資源分類：醫(yī)學(xué) - 功能檢查科
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上傳日期：2013-07-30 14:09:38

血液乙肝、丙肝和艾滋病病毒核酸檢測(cè)技術(shù)及應(yīng)用 浙江省血液中心 朱發(fā)明 2010-04 提綱 輸血風(fēng)險(xiǎn) 血液NAT篩查 必要性 NAT篩查現(xiàn)狀 現(xiàn)有技術(shù) 實(shí)時(shí)熒光PCR 轉(zhuǎn)錄介導(dǎo)擴(kuò)增技術(shù) 國(guó)內(nèi)數(shù)據(jù)情況 實(shí)施過(guò)程中的要點(diǎn) 結(jié)果分析解釋要點(diǎn) 進(jìn)展與動(dòng)態(tài) 輸血風(fēng)險(xiǎn) 輸血不良反應(yīng)的比例 殘留風(fēng)險(xiǎn)的來(lái)源 感染窗口期 90%以上 現(xiàn)有試劑未檢測(cè)病毒變異 (種屬,亞型) 感染后免疫沉默攜帶者（抗體陰性） 持續(xù)病毒感染但血清學(xué)陰性 比較罕見(jiàn) HCV事例 2 例標(biāo)本HCV RNA陽(yáng)性，6個(gè)月后HCV抗體陰性(120萬(wàn)檢測(cè)標(biāo)本) 錯(cuò)誤 (人為錯(cuò)誤） 0.05% 確認(rèn)陽(yáng)性人為偏差為陰性 (Busch et al. Trans. 2000) 核酸檢測(cè)的必要性和可行性 存在殘留風(fēng)險(xiǎn) 數(shù)據(jù)未知 窗口期事件 90%以上 ELISA檢測(cè)技術(shù)不足 **要求 社會(huì)期望 行業(yè)需求 核酸技術(shù)日趨成熟 經(jīng)濟(jì)的發(fā)展 關(guān)注輸血傳播性疾病 HBV 早期感染標(biāo)志物 HCV 早期感染標(biāo)志物 HIV-1流行 HIV 早期感染標(biāo)志物 NAT檢測(cè)的現(xiàn)狀 國(guó)際上 1990s’歐洲開(kāi)始對(duì)血液制品進(jìn)行核酸檢測(cè)（HIV,HCV） 1996年美國(guó)開(kāi)始評(píng)估NAT技術(shù)在血站的應(yīng)用 中國(guó)香港，新加坡，馬來(lái)西亞，印尼等周邊國(guó)家采用NAT技術(shù) 檢測(cè)（單檢、混樣） 國(guó)內(nèi)情況 血站早期研究數(shù)據(jù) 部分血站進(jìn)行NAT檢測(cè) 血站大規(guī)模試點(diǎn) 血制品要求進(jìn)行篩選（pool） NAT技術(shù) 病原體核酸檢測(cè)技術(shù)(nucleic acid testing)是直接檢測(cè)病原體核酸的一系列技術(shù)的總稱 NAT敏感性高 檢測(cè)核酸 大大縮短“窗口期” 可使輸血傳播疾病的危險(xiǎn)性降低 NAT檢測(cè)的技術(shù)方法 在PCR的基礎(chǔ)上衍生 PCR技術(shù) 實(shí)時(shí)熒光定量PCR TMA(轉(zhuǎn)錄介導(dǎo)的擴(kuò)增系統(tǒng)) 其他：NASBA, bDNA 大樣本量血液篩查的擴(kuò)增技術(shù) PCR技術(shù) TMA技術(shù)(轉(zhuǎn)錄介導(dǎo)的擴(kuò)增系統(tǒng)(transc**tion mediated amplification) 不同的技術(shù)平臺(tái)： PCR技術(shù) PCR技術(shù) 衍生的技術(shù) RT-PCR 巢式PCR 多重PCR PCR-SSP 不對(duì)稱PCR 熒光定量PCR TaqMan探針?lè)? TaqMan作用原理 轉(zhuǎn)錄介導(dǎo)的擴(kuò)增方法 (TMA) 轉(zhuǎn)錄介導(dǎo)的擴(kuò)增系統(tǒng)(transc**tion mediated amplification,TMA) 諾華診斷 鼠白血病病毒逆轉(zhuǎn)錄酶和T7 RNA多聚酶 在等溫條件下來(lái)擴(kuò)增RNA或DNA的反應(yīng)系統(tǒng) 核酸序列依賴擴(kuò)增系統(tǒng)(nucleic acidｓsequence based amplification,　NASBA) 荷蘭產(chǎn)品 原理類似TMA 靶標(biāo)擴(kuò)增 NAT檢測(cè)數(shù)據(jù)及其效果 NAT提高血液安全水平 國(guó)內(nèi)數(shù)據(jù) 上海血液中心 美國(guó)Chiron Procleix HIV-1/HCV 8人份（36800） 24 人份混合（66739）； HCV NAT+: 0／103539 HIV NAT+: 0／103539 ELISA為進(jìn)口試劑、國(guó)產(chǎn) 中國(guó)輸血雜志，2003，16（3）：157-160

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