腎移植的急性排異（AR）增大了移植腎慢性損傷和衰竭的風(fēng)險(xiǎn)，所以急需無創(chuàng)分子測定來改進(jìn)疾病診斷和病人監(jiān)護(hù)。

    BioMark HD和EP1平臺擁有數(shù)字陣列集成流控電路，可實(shí)現(xiàn)定量實(shí)時聚合酶鏈反應(yīng)盡管用了免疫抑制療法，大約15%到20%的腎移植患者仍會發(fā)生急性排異，血清肌酐是腎功能的標(biāo)記物，它水平的升高往往預(yù)示著排異，然后進(jìn)行腎活組織檢查，確認(rèn)是否發(fā)生了排異。

    美國加利福尼亞大學(xué)舊金山分校的科學(xué)家與來自多國的科學(xué)家合作，在2005年至2012年間收集了美國、墨西哥和西班牙的八座腎移植中心438名成人和兒童腎移植患者的558份外周血樣本，以開發(fā)定量實(shí)時聚合酶鏈反應(yīng)（qPCR）檢驗(yàn)產(chǎn)品。他們用急性排異或無急性排異（由腎活組織檢查確定）成人的143份樣本開發(fā)了這種檢驗(yàn)產(chǎn)品，然后用三組患者完成并確證該檢驗(yàn)產(chǎn)品。

    用基于柱方法的試劑盒提取總核糖核酸（RNA），在安捷倫科技公司（Santa Clara, CA, USA）的2100生物分析儀上用RNA 6000納米芯片實(shí)驗(yàn)室試劑盒測量RNA完整度。在96.96動態(tài)陣列和芯片上執(zhí)行微流控qPCR,通過HX IFC控制器預(yù)先加載該芯片并在Fluidigm公司（South San Francisco, CA, USA）的BioMark qPCR平臺上執(zhí)行qPCR.

    科研小組評估了43個基因中10個基因的差異表達(dá)，選擇已確證的同樣10個基因作為標(biāo)記物，用標(biāo)準(zhǔn)化的臨床實(shí)驗(yàn)樣本收集和處理程序診斷外周血中急性排異的。為了提高143份成人樣本的急性排異診斷準(zhǔn)確度，用多種統(tǒng)計(jì)建模方法又找到7個基因，提高了基因組合鑒別急性排異與非急性排異樣本的準(zhǔn)確度，所以最終的選擇是17個基因。該測定名為kSORT,能區(qū)分急性排異風(fēng)險(xiǎn)高和風(fēng)險(xiǎn)低的患者。無論任何年齡、移植后經(jīng)過的時間以及樣本源，kSORT測定都能夠檢測血液中的急性排異，無需額外的數(shù)據(jù)歸一化。

    該研究的論文發(fā)表于2014年11月11日的《公共科學(xué)圖書館》雜志《醫(yī)學(xué)》分冊上。作者總結(jié)說，kSORT測定是一種簡單、穩(wěn)定、可用于臨床的血液檢驗(yàn)。他們正在用 kSORT進(jìn)行一項(xiàng)前瞻性觀察實(shí)驗(yàn)以及另一項(xiàng)前瞻性隨機(jī)雙盲臨床干預(yù)實(shí)驗(yàn)，以確定移植后如何繼續(xù)應(yīng)用kSORT,輔助現(xiàn)有的臨床規(guī)程指南分類病人的免疫風(fēng)險(xiǎn)、藥物載荷和活檢要求。