據原衛(wèi)計委發(fā)布的《中國出生缺陷防止報告（2012）》數據顯示，我國出生缺陷總發(fā)生率約為5.6%,每年新增出生缺陷病例高達90萬例，其中最常見的是唐氏綜合征。中國內地每年大約有26,000名唐氏患兒出生[1],平均每20分鐘就出生一個，因此，唐氏綜合征已成為影響我國國民經濟發(fā)展和出生人口素質的重要原因。產前篩查與診斷是防止出生缺陷的重要方法之一，產前檢測技術的創(chuàng)新與發(fā)展也因此受到國內外業(yè)界越來越多的關注。

    日前，在北京舉行的“第二屆中國母胎醫(yī)學大會”上，羅氏診斷Ariosa公司首席醫(yī)療官Thomas J Musci、國際商務拓展總監(jiān)Sabah Oney與眾多圍產醫(yī)學、產前診斷、超聲影像、兒科及醫(yī)學遺傳學等專家一同深入探討了唐氏綜合征無創(chuàng)產前檢測（Non-invasive Prenatal Testing,NIPT）的最新技術及臨床應用，并分享了HarmonyTM無創(chuàng)產前檢測產品的技術革新及臨床研究成果，旨在推進產前檢測領域新技術的應用與傳播，提高胎兒的存活率及生存質量。

    NIPT:更安全、有效的唐篩方法

    染色體數目異常是一種偶發(fā)性疾病，也是最為嚴重的出生缺陷之一。受高齡妊娠、自身免疫疾病、遺傳、病毒感染以及長期在放射性或污染環(huán)境下工作等因素影響，每一位孕婦都有可能懷上患有染色體非整倍體的胎兒。臨床上最常見的非整倍體主要包括21-三體綜合征（唐氏綜合征）、18-三體綜合征（愛德華氏綜合征）、13-三體綜合征（帕陶氏綜合征），以及一些性染色體三體型和X單體型。其中，21-三體綜合征發(fā)病率高達1/800——1/600,多數患兒都能通過分娩存活，但表現(xiàn)為先天智力低下、生長發(fā)育遲緩，常伴有五官、四肢、內臟等方面畸形，迄今無法根治，只能通過產前篩查和診斷進行預防。

    為此，產前篩查已成為許多國家的普遍做法，我國目前采用的是早孕期篩查和中孕期篩查的二級預防模式。早孕期篩查包括血清學標志物檢測和超聲頸部半透明厚度篩查（Nuchal Translucency,NT）；中孕期篩查主要是結合孕婦年齡，尤其是高危孕婦的三聯(lián)血清學篩查。但應用最廣泛的中孕期三聯(lián)血清學篩查技術仍存在較低的檢出率（70%）和較高的假陽性率（5%）。漏篩或不必要的侵入性產前診斷不僅增加了正常胎兒丟失的風險，也為孕婦及其家屬帶來了極大的心理負擔，大大降低了產前診斷的依從性。因此，臨床亟需更為準確、安全、有效的產前檢測方法。

    隨著醫(yī)療技術和醫(yī)學觀念的不斷進步，一種新興的無創(chuàng)產前檢測（NIPT）在全球得以迅速應用，該檢測利用大規(guī)模平行測序技術對母體外周血中的游離細胞DNA（cfDNA）進行深度測序，獲取胎兒染色體信息，測量胎兒的DNA分數，從而評估胎兒是否患有染色體數目異常的風險，因其更高的準確性與安全性正逐漸得到業(yè)內專家的高度重視與廣泛認可。

    技術革新突破：HarmonyTM實現(xiàn)更精準、廣泛的臨床應用臨床實驗發(fā)現(xiàn)，胎兒游離DNA在母體外周血中平均比例約為10%.發(fā)表于2013年Prenatal Diagnosis雜志上的臨床研究顯示[2],對22,384例樣本進行分析發(fā)現(xiàn)，有2%的樣本胎兒游離DNA比例小于4%.Thomas J Musci教授解釋：“這部分樣本胎兒游離DNA比例過小，與母體體重、過小妊娠周期等孕征密切相關，導致其檢測結果對于識別是否患有21-三體綜合征是不準確、不可信的。而HarmonyTM技術中針對21-三體檢測優(yōu)化的專利分析FORTETM算法能夠整合胎兒游離DNA比例、母親年齡以及孕周等參數，更清晰地區(qū)分陽性和陰性結果。相較于Z檢驗計算法，F(xiàn)ORTETM算法不依賴于背景數據庫和人群，可以直接給出胎兒患非整倍體疾病的風險值，提高結果的準確性，將假陽性率控制在0.1%以內。”

    此外，HarmonyTM的另一項專利DANSRTM富集技術，與目前全基因組測序的方法完全不同，通過集中檢測目標位點，保證結果的準確性，甚至更勝于全基因組檢測的方法。Sabah Oney補充道：“HarmonyTM選用的微陣列芯片技術能夠將檢測時間縮短到7.5小時，并實現(xiàn)高通量檢測，一臺儀器一天可以檢測1,000多個樣本，全自動化的流程相比全基因組測序方法結果更穩(wěn)定，可重復性強。同時，通過將胎兒DNA含量與芯片結果相結合，HarmonyTM能夠對每個樣本每一種三體風險進行單獨評價與打分評估，包括雙胎案例。因此，HarmonyTM在時間、成本等方面都優(yōu)于現(xiàn)有的下一代測序（NGS）技術，操作快速、簡單，具有廣泛的應用前景。”

    大規(guī)模研究證實：HarmonyTM臨床表現(xiàn)更佳

    近期，《新英格蘭醫(yī)學雜志》發(fā)表了一項針對普通懷孕人群在妊娠初期采用HarmonyTM無創(chuàng)產前檢測和常規(guī)孕早期聯(lián)合篩查（FTS,包括NT篩查和血清學生化指標篩查）分別評估胎兒患有21-三體綜合征風險的對比研究。該研究（NEXT）通過6個國家的35個國際中心，招募了18,955位18周歲以上、孕期10-14周的適齡孕婦來進行，是迄今為止規(guī)模最大的臨床試驗。

    Thomas J Musci指出：“基于Ⅰ期研究的15,841位孕婦及胎兒結果證實，HarmonyTM檢測的假陽性率（0.06%）比FTS的假陽性率（5.4%）低90倍以上；HarmonyTM檢測鑒別21-三體綜合征的準確率達100%,而FTS僅為78.9%;HarmonyTM的陽性預測值為80.9%,FTS陽性預測值僅為3.4%.因此，與FTS相比，HarmonyTM產前檢測在準確評估引發(fā)唐氏綜合征的風險方面具有顯著統(tǒng)計學優(yōu)勢。”

    在對11,994例低風險妊娠病例（母親年齡<35歲）進行的亞分析中，HarmonyTM檢測鑒別21-三體綜合征的假陽性率為0.05%,陽性預測值為76%.在總研究人群中，HarmonyTM檢測具有相同出色的表現(xiàn)。Ⅱ期研究使用FTS和HarmonyTM對18-三體、13-三體的檢測結果發(fā)現(xiàn)，基于cfDNA的HarmonyTM檢測對18-三體和13-三體同樣具有更高的敏感性和陽性檢出率以及更低的假陽性率。

    HarmonyTM:適用于普通孕婦人群的新一代三體檢測技術值得一提的是，21-三體發(fā)病率隨著母親年齡增大而增高，但同時統(tǒng)計數據表明，80%的唐氏綜合征患兒由年齡小于35歲的母親生育。因此，專家建議每一位孕婦都應該進行產前篩查。NEXT研究也證實了HarmonyTM檢測對于18-50周歲適齡孕婦的可行性，其對高危孕婦和低危孕婦的檢測敏感性和陽性檢出率均高于FTS.Sabah Oney表示：“NEXT研究支持將NIPT用作所有孕婦的一線篩查項目。作為針對一般懷孕人群的檢測，HarmonyTM無創(chuàng)產前檢測準確性高，臨床實用性和可操作性強，同時可降低花費。”

    目前，HarmonyTM檢測通過大量的臨床數據集被證實符合美國臨床實驗室改進修正案（CLIA）、美國病理學家學會（CAP）和實驗室開發(fā)診斷試劑監(jiān)管模式（LDT）認證，預計將于今年10月底完成歐盟CE認證注冊。目前，全世界范圍內已有100多個國家和地區(qū)采用了HarmonyTM無創(chuàng)產前檢測，并已指導超過45萬名妊娠女性的臨床護理。

    [1] 中國疾病預防控制中心http://www.chinacdc.cn/n272442/n272530/n272817/n272877/32964.html

    [2] Wang E et al. 2013Prenatal Diagnosis