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我科學(xué)家研制出新的miRNA檢測(cè)法

2015-04-07 19:16 閱讀:1122 來(lái)源:生物通 作者:學(xué)**涯 責(zé)任編輯:學(xué)海無(wú)涯
[導(dǎo)讀] 最近,成都中醫(yī)藥大學(xué)、都江堰醫(yī)學(xué)中心和成都諾恩生物科技有限公司(Nuoen)的研究人員,開(kāi)發(fā)出一種最新的miRNA檢測(cè)方法,可以幫助我們把microRNA轉(zhuǎn)變成為強(qiáng)大的診斷標(biāo)志物,并減少不適當(dāng)?shù)目股靥幏健?

    最近,成都中醫(yī)藥大學(xué)、都江堰醫(yī)學(xué)中心和成都諾恩生物科技有限公司(Nuoen)的研究人員,開(kāi)發(fā)出一種最新的miRNA檢測(cè)方法,可以幫助我們把microRNA轉(zhuǎn)變成為強(qiáng)大的診斷標(biāo)志物,并減少不適當(dāng)?shù)目股靥幏健?br />  



    作為各種各樣疾病的一種重要調(diào)節(jié)分子,microRNAs(miRNAs)用作非侵入性診斷生物標(biāo)志物,已經(jīng)顯示出巨大的潛力,可能有一天被用于早期診斷和預(yù)后。然而,目前還沒(méi)有一種miRNAs檢測(cè)方法已被證明足夠可靠地應(yīng)用于臨床。

    這種新的miRNA檢測(cè)方法——命名為miRNA衍生片段長(zhǎng)度多態(tài)性(miRFLP),可以快速、準(zhǔn)確地驗(yàn)證體液標(biāo)本中的miRNA標(biāo)記,以用于臨床設(shè)置的疾病診斷。這一研究結(jié)果發(fā)表在最近的Nature子刊《Scientific Reports》。

    本研究負(fù)責(zé)人徐凱(Kai Xu)指出:“相比較其他方法,miRFLP法為我們提供了一種可靠的miRNA檢測(cè)方法,是唯一能夠在不同種類粗樣品中直接檢測(cè)microRNA拷貝數(shù)的方法。這使我們能夠在24小時(shí)的時(shí)間框架內(nèi),為患者提供測(cè)試結(jié)果。”

    徐凱的研究小組發(fā)現(xiàn),特定的miRNA往往通過(guò)在血液和其他體液中上調(diào)或下調(diào),而反應(yīng)各種不同的疾病。利用miRFLP技術(shù),該實(shí)驗(yàn)室將可以將目標(biāo)miRNA與合成RNA spike-ins組合,同時(shí)轉(zhuǎn)換成不同大小的DNA片段。通過(guò)同時(shí)測(cè)量miRNA和RNA spike-ins,實(shí)驗(yàn)室可以從少量未純化的血液樣本中,直接獲得目標(biāo)miRNA拷貝。

    通過(guò)實(shí)驗(yàn),該研究團(tuán)隊(duì)最終發(fā)現(xiàn),只需要0.2毫升的血清,就能精確地檢測(cè)出低至每個(gè)樣本中一個(gè)拷貝的目標(biāo)miRNA數(shù)量。

    徐凱解釋說(shuō):“不同于其他的方法,我們利用PCR來(lái)同時(shí)擴(kuò)增所有信號(hào),利用毛細(xì)管電泳技術(shù)檢測(cè)不同大小的片段及其熒光。我們用它來(lái)制作一個(gè)標(biāo)準(zhǔn)曲線,并測(cè)定每個(gè)目標(biāo)microRNA數(shù)量,其余部分是一個(gè)程序,將它們轉(zhuǎn)換為真實(shí)副本。”

    新的方法能提供一個(gè)有價(jià)值的非侵入性替代方法,很快檢測(cè)器官損傷、癌癥、糖尿病和許多其他疾病。根據(jù)徐凱介紹,miRFLP的第一個(gè)臨床試驗(yàn),將與哮喘密切相關(guān)的microRNA表達(dá)上調(diào),與患者細(xì)菌或病毒感染相關(guān)的microRNA區(qū)分開(kāi)來(lái)。

    徐凱說(shuō):“用一滴血,我們就可以告訴你是否患有哮喘、細(xì)菌感染或病毒感染。我們的測(cè)試法將給病人帶來(lái)很多好處,并避免濫用抗生素,這是一個(gè)全球問(wèn)題。”


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